文章概要
该文献主要探讨了利用透明质酸（HA）作为二维平面基质，在完全无血清的培养基系统中，成功将人多能干细胞成功诱导分化为间充质基质细胞样细胞群（被称为“间充质基质细胞”或hMS）的创新工艺。研究结果表明，所得细胞不仅符合国际细胞治疗协会（ISCT）鉴定的最低表面标志物标准，还在体外实验展现出支持造血干/祖细胞扩增以及显著的免疫调节功能，如抑制淋巴细胞增殖和调节靶向巨噬细胞的炎症因子分泌等功能。通过RNA测序对比，证实这些细胞呈现出一种比成人骨髓MSC更偏向早期发育阶段的独特中内胚层基因组特征。
Guava™easyCyte™系统的关键应用
在特定造血祖细胞培养基中，使用HA分化后第19代的三个独立重复批次的hMS，分别将固定数量的hMS与递增起始数量的脐带血外周血单个核细胞（UCB-PBMC）共培养7天，随后检测CD34和CD133双阳性细胞的产量。
图1：共培养示意图
培养结束后通过Guava™easyCyte™系统测定活细胞中CD45⁺ PBMC群体中CD34⁺/CD133⁺细胞的数量。发现有两组实验中CD34⁺/CD133⁺细胞的数量与UCB-PBMC起始数量成正比，为hMS可以促进支持造血祖细胞的生长这一观点提供重要证据。
图2：共培养后对CD34⁺/CD133⁺细胞的计数
将新鲜分离的脐带血衍生单核细胞（UCB-derived MNC）和不同的浓度的hMS在无血清的培养基中进行共同培养后，使用Guava™ ViaCount™试剂盒在easyCyte™系统上对培养基上清液中的细胞进行精准的活性检测和绝对计数。
ViaCount™检测试剂盒中包含活性染料，搭载easyCyte™系统可直接检测活细胞的数量。并且easyCyte™系统上预设了ViaCount™试剂盒检测模块，该模块预设了流式图、门控、每群细胞的名称等，实验者仅需微调一些参数，即可上机检测。此外在该模块的界面，会直接展示出活细胞和总细胞的活性以及数量的统计报告。简单快捷的检测流程，即使是新手也能快速掌握！
图3：仪器软件内置ViaCount™实验的分析模板
Guava™ easyCyte™系统应用
在干细胞治疗领域的优势总结
在一个平台即可完成干细胞治疗领域高频实验分析，大幅降本增效
ViaCount™试剂盒+预优化软件模块，提供细胞活性和计数的精准极简解决方案
节省准备鞘液的时间，并极大降低处理生物危害废液的难度和成本
极致节省干细胞等珍贵样本
可完全满足工业客户的合规需求
HT高通量上样台完美集成96孔板和10个单样品管，交叉污染率低；更可外接机械臂，真正实现无人值守的自动化进样
软件内置Heat Map功能，直观地显示96孔板数据间的关联性，快速定位目标孔位，极大提升分析的效率
在干细胞药物加速走向临床的今天，选择高效、精准且合规的检测平台是成功的关键。Cytek® Guava™ easyCyte™系统，助您在这条干细胞治疗的赛道上快人一步！
参考文献：
1. Naithani, et al. Single Versus Dual Platform Analysis for Hematopoietic Stem Cell Enumeration Using ISHAGE Protocol. Indian Journal of Hematology and Blood Transfusion. 2016
2. Saraiva L, et al. Comparison of Volumetric and Bead-Based Counting of CD34 Cells by Single-Platform Flow Cytometry. Cytometry Part B. 2019
3. De Sousa PA, et al. Hyaluronan in mesenchymal stromal cell lineage differentiation from human pluripotent stem cells: application in serum free culture. Stem Cell Res Ther. 2024
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